סדרה של ניסויי פיילוט מבוססי בקתות נערכו ב-Khowe, דרום בנין, כדי להעריך את היעילות הביולוגית של כילות יתושים מהדור הבא החדשים שנבדקו בשטח נגד וקטורי מלריה עמידים לפירתרין. רשתות מיושנות שדה הוצאו ממשקי הבית לאחר 12, 24 ו-36 חודשים. חלקי רשת חתוכים מ-ITNs שלמים נותחו עבור הרכב כימי ובדיקות ביולוגיות של רגישות נערכו במהלך כל ניסוי כדי להעריך שינויים בעמידות לקוטלי חרקים באוכלוסיית הווקטורים של Khowe.
Interceptor® G2 עשה ביצועים טובים יותר מ-ITN אחרים, ואישר את העדיפות של רשתות פירטרואידים וכלורפנפיר על פני סוגי רשתות אחרים. בין המוצרים החדשים, כל ITNs מהדור הבא הפגינו יעילות ביולוגית טובה יותר מאשר Interceptor®; עם זאת, עוצמת השיפור הזה הופחתה לאחר ההזדקנות בשטח בשל העמידות הקצרה יותר של תרכובות שאינן פירטרואידיות. תוצאות אלו מדגישות את הצורך לשפר את התמדה קוטל חרקים של ITNs מהדור הבא.
קוטל חרקיםרשתות יתושים מטופלות (ITNs) מילאו תפקיד קריטי בהפחתת תחלואה ותמותה ממלריה במהלך 20 השנים האחרונות. מאז 2004, יותר מ-3 מיליארד ITNs הופצו ברחבי העולם, ומחקרי מודלים מצביעים על כך ש-68% ממקרי המלריה באפריקה שמדרום לסהרה נמנעו בין השנים 2000 ל-2015. למרבה הצער, העמידות של אוכלוסיות וקטור מלריה לפירטרואידים (המעמד הסטנדרטי של קוטלי חרקים המשמשים ב-ITNs) עלתה באופן משמעותי, מה שמאיים על היעילות של התערבות חיונית זו. במקביל, ההתקדמות בשליטה במלריה הואטה בעולם, כאשר מספר מדינות בנטל גבוה חוו עלייה במקרי המלריה מאז 2015. מגמות אלו הניעו את הפיתוח של דור חדש של מוצרי ITN חדשניים שמטרתם להתמודד עם האיום של עמידות לפירתרואידים ולעזור להפחית נטל זה ולהשיג יעדים גלובליים שאפתניים.
כיום קיימים בשוק שלושה ITNs מהדור החדש, כל אחד משלב פירטרואיד עם קוטל חרקים אחר או סינרגיסט המסוגל להתגבר על עמידות לפירתרואידים בוקטורי מלריה. בשנים האחרונות, נערכו מספר ניסויים אקראיים מבוקר מקבץ (RCTs) כדי להעריך את היעילות האפידמיולוגית של רשתות אלו בהשוואה לרשתות סטנדרטיות לפירטרואידים בלבד וכדי לספק את הראיות הדרושות לתמיכה בהמלצות ארגון הבריאות העולמי (WHO). רשתות מיטה המשלבות פירטרואידים עם פיפרוניל בוטוקסיד (PBO), סינרגיסט המשפר את היעילות של פירטרואידים על ידי עיכוב אנזימי ניקוי רעלים של יתושים, היו הראשונות שהומלצו על ידי ארגון הבריאות העולמי לאחר ששני מוצרים (Olyset® Plus ו-PermaNet® 3.0) הדגימו השפעה אפידמיולוגית טובה יותר בטנזניה בהשוואה להשפעה אקראית של טנזניה בהשוואה לאנדרלמוסידיים נטוליסטיים. ואוגנדה. עם זאת, יש צורך בנתונים נוספים כדי לקבוע את הערך לבריאות הציבור של רשתות מיטות פירטרואיד-PBO במערב אפריקה, שם עמידות חמורה לפירתרואידים עשויה להפחית את היתרונות שלהן בהשוואה לרשתות מיטה לפירתרואידים בלבד.
התמדה קוטל חרקים של ITNs מוערכת בדרך כלל על ידי איסוף תקופתי של רשתות מקהילות ובדיקתן במבחנים ביולוגיים מעבדתיים באמצעות זני יתושים מגזע חרקים. בעוד שמבחנים אלה שימושיים לאפיון הזמינות הביולוגית והיעילות של קוטלי חרקים על פני רשתות המיטה לאורך זמן, הם מספקים מידע מוגבל על היעילות ההשוואתית של סוגים שונים של רשתות מיטה מהדור הבא, מכיוון שהשיטות וזני היתושים המשמשים חייבים להיות מותאמים לאופן הפעולה של קוטלי החרקים שהם מכילים. מבחן הצריף הניסיוני הוא גישה חלופית שניתן להשתמש בה כדי להעריך באופן השוואתי את היעילות של רשתות שטופלו בקוטלי חרקים במחקרי עמידות בתנאים המחקים את האינטראקציות הטבעיות בין מארח יתושי בר ורשתות ביתיות במהלך השימוש. ואכן, מחקרי מודלים עדכניים באמצעות פונדקאיות אנטומולוגיות לנתונים אפידמיולוגיים הראו שתמותת יתושים ושיעורי האכלה שנמדדו בניסויים אלה יכולים לשמש כדי לחזות את ההשפעה של ITNs על שכיחות המלריה ושכיחות ב-RCT מקבץ. לפיכך, ניסויים ניסיוניים מבוססי בקתה, בהם בלוטות לימפה שטופלו בקוטלי חרקים שנאספו בשטח נכללות ב-RCT מקבץ עשויים לספק נתונים חשובים על היעילות הביולוגית וההתמדה הקוטלית של בלוטות הלימפה שטופלו בקוטלי חרקים לאורך תוחלת החיים הצפויה שלהן, ולעזור לפרש את התוצאות האפידמיולוגיות של מחקרים אלה.
מבחן הצריף הניסיוני הוא מקום מגורים מדומה מתוקנן המומלץ על ידי ארגון הבריאות העולמי להערכת יעילותן של כילות נגד יתושים שטופלו בקוטל חרקים. בדיקות אלו משכפלות את תנאי החשיפה בעולם האמיתי בהם נתקלים מארח יתושים בעת אינטראקציה עם רשתות מיטה ביתיות, ולכן הן גישה מתאימה ביותר להערכת היעילות הביולוגית של רשתות מיטה משומשות לאורך חיי השירות הצפוי להן.
מחקר זה העריך את היעילות האנטומולוגית של שלושה סוגים שונים של רשתות קוטלי חרקים מהדור החדש (PermaNet® 3.0, Royal Guard® ו- Interceptor® G2) בתנאי שדה באסמים ניסויים והשווה אותם לרשת רגילה של פירתרין בלבד (Interceptor®). כל רשתות היתושים שטופלו בקוטלי חרקים נכללות ברשימה המוסמכת מראש של ארגון הבריאות העולמי להדברה וקטורית. להלן מאפיינים מפורטים של כל כילה נגד יתושים:
במרץ 2020, בוצע קמפיין הפצה רחב היקף של כילות יתושים מיושנות שדה בכפרי צריפים במחוז זו, דרום בנין, לצורך ניסויי פיילוט בבקתות. רשתות מיטה Interceptor®, Royal Guard® ו- Interceptor® G2 נבחרו מתוך אשכולות שנבחרו באקראי בעיריות Kove, Zagnanado ו- Ouinhi כחלק ממחקר תצפית על עמידות הממוקם בתוך אשכול RCT כדי להעריך את היעילות האפידמיולוגית של רשתות מיטה כפולות שטופלו בקוטלי חרקים. רשתות יתושים PermaNet® 3.0 נאספו בכפר Avokanzun ליד עיירות ג'יג'ה ובוהיקון (7°20′ N, 1°56′ E) והופצו בו-זמנית עם רשתות יתושים RCT במהלך הקמפיין ההמוני של התוכנית הלאומית לבקרת מלריה ב-2020. איור 1 מציג את המיקומים של אשכולות/כפרי המחקר שבהם נאספו סוגי ה-ITN השונים ביחס לאתרי בקתות הניסוי.
ניסוי בקתת פיילוט נערך כדי להשוות את הביצועים האנטומולוגיים של ITNs Interceptor®, PermaNet® 3.0, Royal Guard® ו-Interceptor® G2 כאשר הוסרו ממשקי בית 12, 24 ו-36 חודשים לאחר ההפצה. בכל נקודת זמן שנתית, הושוו ביצועי ITN מיושנים בתחום לרשתות חדשות ולא בשימוש מכל סוג ורשתות לא מטופלות כבקרה שלילית. בכל נקודת זמן שנתית, סה"כ 54 דגימות משוכפלות של ITNs מיושנות בשטח ו-6 ITNs חדשים מכל סוג נבדקו בניסוי 1 או 2 בקתות משוכפלות עם רוטציה יומית של טיפולים. לפני כל ניסוי בצריף, מדד הנקבוביות הממוצע של רשתות השדה המיושנות מכל סוג ITN נמדד על פי המלצות WHO. כדי לדמות בלאי משימוש יומיומי, כל ה-ITN החדשים ורשתות הבקרה הלא מטופלות חוררו בשישה חורים בגודל 4X4 ס"מ: שניים בכל לוח צד ארוך ואחד בכל לוח צד קצר, בהתאם להמלצות WHO. הכילה הותקנה בתוך הצריף על ידי קשירת קצוות יריעות הגג בחבלים למסמרים בפינות העליונות של קירות הצריף. הטיפולים הבאים הוערכו בכל ניסוי בקתה:
רשתות מיושנות שדה הוערכו בבקתות ניסוי באותה שנה שבה הוסרו הרשתות. ניסויים בצריף נערכו באותו אתר ממאי עד ספטמבר 2021, מאפריל עד יוני 2022 וממאי עד יולי 2023, כשהרשתות הוסרו לאחר 12, 24 ו-36 חודשים, בהתאמה. כל ניסוי נמשך מחזור טיפול שלם אחד (54 לילות במשך 9 שבועות), למעט 12 חודשים, כאשר שני מחזורי טיפול רצופים נערכו כדי להגדיל את גודל מדגם היתושים. בעקבות עיצוב ריבוע לטיני, הטיפולים חולפו מדי שבוע בין בקתות ניסוי כדי לשלוט על השפעות מיקום הבקתות, בעוד שמתנדבים התחלפו מדי יום כדי לבדוק את ההבדלים באטרקטיביות היתושים של מארחים בודדים. יתושים נאספו 6 ימים בשבוע; ביום 7, לפני מחזור הסיבוב הבא, הצריפים נוקו ואווררו כדי למנוע זיהום.
מדדי היעילות העיקריים לטיפול בצריף הניסיוני נגד יתושי Anopheles gambiae העמידים לפירתרואידים והשוואה של ה-ITN של הדור הבא עם רשת Interceptor® של פירטרואידים בלבד היו:
נקודות הקצה המשניות של יעילות הטיפול הניסיוני נגד יתושי Anopheles gambiae העמידים לפירתרואידים היו כדלקמן:
בלימה (%) – הפחתה בשיעור הכניסה לקבוצה המטופלת בהשוואה לקבוצה הלא מטופלת. החישוב הוא כדלקמן:
כאשר Tu הוא מספר היתושים הנכללים בקבוצת הביקורת הלא מטופלת, ו-Tt הוא מספר היתושים הנכללים בקבוצה המטופלת.
שיעור נטישה (%) – שיעור נטישה כתוצאה מגירוי פוטנציאלי מהטיפול, מתבטא כשיעור היתושים שנאספו במרפסת.
. מקדם דיכוי מציצת דם (%) הוא הירידה בשיעור היתושים מוצצי הדם בקבוצה המטופלת בהשוואה לקבוצת הביקורת הלא מטופלת. שיטת החישוב היא כדלקמן: כאשר Bfu הוא שיעור היתושים מוצצי הדם בקבוצת הביקורת הלא מטופלת, ו-Bft הוא שיעור היתושים מוצצי הדם בקבוצה המטופלת.
ירידה בפוריות (%) - הפחתה בשיעור היתושים הפוריים בקבוצה המטופלת בהשוואה לביקורת הלא מטופלת. שיטת החישוב היא כדלקמן: כאשר Fu הוא שיעור היתושים הפוריים בקבוצת הביקורת הלא מטופלת, ו- Ft הוא שיעור היתושים הפוריים בקבוצה המטופלת.
כדי לנטר שינויים בפרופיל העמידות של אוכלוסיות וקטורים של Covè לאורך זמן, ארגון הבריאות העולמי ביצע בדיקות ביולוגיות במבחנה ובקבוקונים באותה שנה של כל ניסוי בקתת ניסוי (2021, 2022, 2023) כדי להעריך את הרגישות ל-AI ב-ITNs הנבדקים ולהודיע על פרשנות התוצאות. במחקרים במבחנה, יתושים נחשפו לניירות סינון שטופלו בריכוזים מוגדרים של אלפא-ציפרמטרין (0.05%) ודלתאמטרין (0.05%), ולבקבוקים מצופים בריכוזים מוגדרים של CFP (100 מיקרוגרם/בקבוק) ו-PPF (100 מיקרוגרם/בקבוק) כדי להעריך את מידת הרגישות הללו. עוצמת העמידות לפירתרואידים נחקרה על ידי חשיפת יתושים לריכוזים דיפרנציאליים של פי 5 (0.25%) ופי 10 (0.50%) של α-cypermethrin ו-deltamethrin. לבסוף, התרומה של סינרגיה PBO ושל ביטוי יתר של ציטוכרום P450 מונואוקסיגנאז (P450) לעמידות לפירתרואידים הוערכה על ידי חשיפה מוקדמת של יתושים לריכוזים דיפרנציאליים של α-cypermethrin (0.05%) ודלתאמטרין (0.05%), וחשיפה מוקדמת ל-PBO (4%). נייר הסינון ששימש לבדיקת השפופרת של WHO נרכש מ-Universiti Sains Malaysia. בקבוקוני הבדיקה הביולוגית של WHO באמצעות CFP ו-PPF הוכנו בהתאם להמלצות WHO.
יתושים ששימשו לבדיקות ביולוגיות נאספו בשלב הזחל מאתרי רבייה ליד בקתות הניסוי ולאחר מכן גודלו למבוגרים. בכל נקודת זמן, לפחות 100 יתושים נחשפו לכל טיפול למשך 60 דקות, עם 4 שכפולים לכל צינור/בקבוק וכ-25 יתושים לכל צינור/בקבוק. עבור חשיפת פירתרואידים ו-CFP, נעשה שימוש ביתושים לא מוזנים בני 3-5 ימים, ואילו עבור PPF, יתושים מוצצי דם בני 5-7 ימים שימשו כדי לעורר אוגנזה ולהעריך את ההשפעה של PPF על רביית היתושים. חשיפות מקבילות נערכו באמצעות נייר סינון ספוג בשמן סיליקון, PBO מסודר (4%) ובקבוקים מצופים באצטון כבקרות. בתום החשיפה הועברו היתושים למיכלים לא מטופלים ונחשפו לצמר גפן ספוג בתמיסת גלוקוז של 10% (w/v). תמותה נרשמה 24 שעות לאחר חשיפה לפירטרואידים וכל 24 שעות במשך 72 שעות לאחר חשיפה ל-CFP ו-PPF. כדי להעריך את הרגישות ל-PPF, נותחו יתושים שורדים שנחשפו ל-PPF ובקרות שליליות תואמות לאחר שתועדה תמותה מאוחרת, נצפתה התפתחות שחלות באמצעות מיקרוסקופ מורכב, והפוריות הוערכה על פי שלב התפתחות הביציות של כריסטופר [28, 30]. אם הביצים התפתחו במלואן לשלב V של כריסטופר, היתושים סווגו כפוריות, ואם הביצים לא התפתחו במלואן ונשארו בשלבים I–IV, היתושים סווגו כסטריליים.
בכל נקודת זמן של השנה, חתיכות בגודל 30 × 30 ס"מ נחתכו מרשתות חדשות ומתיישנות בשטח במקומות המצוינים בהמלצות WHO [22]. לאחר החיתוך, הרשתות סומנו, עטפו בנייר אלומיניום ואוחסנו במקרר בטמפרטורה של 4 ± 2 מעלות צלזיוס כדי למנוע נדידת AI לתוך הבד. הרשתות נשלחו לאחר מכן למרכז המחקר החקלאי הוולוני בבלגיה לניתוח כימי כדי למדוד שינויים בתכולת הבינה המלאכותית הכוללת במהלך חיי השירות שלהן. השיטות האנליטיות בהן נעשה שימוש (בהתבסס על השיטות המומלצות על ידי הוועדה השיתופית הבינלאומית לניתוח חומרי הדברה) תוארו בעבר [25, 31].
עבור נתוני הניסוי של הצריף, המספר הכולל של יתושים חיים/מתים, נושכים/לא נושכים ופוריים/סטריליים בתאי הצריף השונים סוכמו עבור כל טיפול בכל ניסוי כדי לחשב את התוצאות הפרופורציונליות השונות (תמותה של 72 שעות, עקיצות, אקטופרזיטיות, לכידה נטו ו-5% התאמתם, הפריון 9). הבדלים בין טיפולים לתוצאות בינאריות פרופורציונליות אלה נותחו באמצעות רגרסיה לוגיסטית, בעוד שההבדלים עבור תוצאות הספירה נותחו באמצעות רגרסיה בינומית שלילית. מכיוון ששני מחזורי רוטציה של טיפול נערכו כל 12 חודשים וחלק מהטיפולים נבדקו על פני ניסויים, ניתוחי חדירת יתושים הותאמו למספר הימים שכל טיפול נבדק. ה-ITN החדש עבור כל תוצאה נותח גם כדי לקבל אומדן יחיד עבור כל נקודות הזמן. בנוסף למשתנה ההסבר העיקרי של הטיפול, כל דגם כלל בקתה, ישן, תקופת ניסוי, מדד צמצם ITN ויום כהשפעות קבועות לשליטה על שונות עקב הבדלים באטרקטיביות של ישן ובקתה בודדים, עונתיות, מצב כילות יתושים ופיזור עודף. ניתוחי רגרסיה יצרו יחסי סיכויים מותאמים (ORs) ורווחי סמך מקבילים של 95% כדי להעריך את ההשפעה של ה-ITN מהדור החדש בהשוואה לרשת פירטרואידים בלבד, Interceptor®, על התוצאות העיקריות של תמותה ופוריות יתושים. ערכי P מהמודלים שימשו גם להקצאת אותיות קומפקטיות המצביעות על מובהקות סטטיסטית ברמה של 5% עבור כל ההשוואות הזוגיות של התוצאות הראשוניות והמשניות. כל ניתוחי הרגרסיה בוצעו בגרסה 18 של Stata.
הרגישות של אוכלוסיות וקטורים של Covese פורשה בהתבסס על תמותה ופוריות שנצפו בבדיקות ביולוגיות במבחנה ובבקבוקים על פי המלצות ארגון הבריאות העולמי. תוצאות ניתוח כימי סיפקו תכולת בינה מלאכותית הכוללת בשברי ITN, אשר שימשה לחישוב שיעור החזקת בינה מלאכותית ברשתות מיושנות בשטח בהשוואה לרשתות חדשות בכל נקודת זמן בכל שנה. כל הנתונים נרשמו באופן ידני בטפסים סטנדרטיים ולאחר מכן הוכנסו פעמיים למסד נתונים של Microsoft Excel.
ועדות האתיקה של משרד הבריאות של בנין (מס' 6/30/MS/DC/DRFMT/CNERS/SA), ה-London School of Hygiene & Tropical Medicine (LSHTM) (מס' 16237) וארגון הבריאות העולמי (מס' ERC.0003153) אישרו את ביצוע ניסוי בקתות טייס בהשתתפות מתנדבים. הסכמה מדעת בכתב התקבלה מכל המתנדבים לפני ההשתתפות במחקר. כל המתנדבים קיבלו כימופרופילקסיה בחינם כדי להפחית את הסיכון למלריה, ואחות הייתה תורנית לאורך כל הניסוי כדי להעריך כל מתנדב שפיתח תסמינים של חום או תגובה שלילית למוצר הבדיקה.
תוצאות מלאות מבקתות הניסוי, המסכמות את המספר הכולל של יתושים חיים/מתים, מורעבים/מוזנים בדם ופוריים/סטריליים עבור כל קבוצת ניסוי, כמו גם נתונים סטטיסטיים תיאוריים מוצגים כחומר משלים (טבלה S1).
בבקתת ניסוי בקובה, בנין, דוכאה האכלה בדם של יתושי Anopheles gambiae עמידים לפירטרואידים. נתונים מבקרים לא מטופלים ומרשתות חדשות נאספו על פני ניסויים כדי לספק אומדן יעילות יחיד. לפי ניתוח רגרסיה לוגיסטית, עמודות עם אותיות נפוצות לא היו שונות משמעותית ברמה של 5% (p>0.05). פסי שגיאה מייצגים רווחי סמך של 95%.
תמותה של יתושי Anopheles gambiae בר עמידים לפירטרואידים הנכנסים לבקתת ניסוי בקובה, בנין. נתונים מביקורות לא מטופלות ומרשתות חדשות נאספו על פני ניסויים כדי לספק אומדן יחיד של יעילות. לפי ניתוח רגרסיה לוגיסטית, עמודות עם אותיות נפוצות לא היו שונות משמעותית ברמה של 5% (p>0.05). פסי שגיאה מייצגים רווחי סמך של 95%.
יחס הסיכויים מתאר את ההבדל בתמותה עם כילות יתושים מהדור החדש לעומת כילות פירטרואידים בלבד. הקו המקווקו מייצג יחס סיכויים של 1, המצביע על שום הבדל בתמותה. יחס סיכויים > 1 מצביע על תמותה גבוהה יותר עם כילות יתושים מהדור החדש. נתונים עבור רשתות יתושים מהדור החדש נאספו על פני ניסויים כדי לייצר אומדן יחיד של היעילות. פסי שגיאה מייצגים רווחי סמך של 95%.
למרות ש-Interceptor® הוכיח את התמותה הנמוכה ביותר מבין כל ה-ITN שנבדקו, הזדקנות השדה לא השפיעה לרעה על השפעתו על התמותה הווקטורית. למעשה, Interceptor® החדש הביא לתמותה של 12%, בעוד שרשתות מיושנות בשטח הראו שיפור קל לאחר 12 חודשים (17%, p=0.006) ו-24 חודשים (17%, p=0.004), לפני שחזרו לרמות דומות לרשתות חדשות לאחר 36 חודשים (11%, p=0.05). לעומת זאת, שיעורי התמותה של הדור הבא של רשתות שטופלו בחומרי חרקים ירדו בהדרגה עם הזמן לאחר הפריסה. הירידה הייתה הבולטת ביותר עם Interceptor® G2, שם התמותה ירדה מ-58% עם הרשתות החדשות ל-36% לאחר 12 חודשים (p< 0.001), 31% לאחר 24 חודשים (עמ'< 0.001), ו-20% לאחר 36 חודשים (עמ'< 0.001). ה-PermaNet® 3.0 החדש הביא לירידה בתמותה ל-37%, שגם היא ירדה משמעותית ל-20% לאחר 12 חודשים (p< 0.001), 16% לאחר 24 חודשים (עמ'< 0.001), ו-18% לאחר 36 חודשים (עמ'< 0.001). מגמה דומה נצפתה עם Royal Guard®, כאשר הרשת החדשה הביאה לירידה של 33% בתמותה, ואחריה ירידה משמעותית ל-21% לאחר 12 חודשים (p< 0.001), 17% לאחר 24 חודשים (עמ'< 0.001) ו-15% לאחר 36 חודשים (עמ'< 0.001).
הפחתה בפוריות של יתושי Anopheles gambiae עמידים לפירטרואידים בר הנכנסים לבקתת ניסוי בקווה, בנין. נתונים מביקורות לא מטופלות ומרשתות חדשות נאספו על פני ניסויים כדי לספק אומדן יחיד של יעילות. פסים עם אותיות נפוצות לא היו שונים באופן מובהק ברמה של 5% (p > 0.05) לפי ניתוח רגרסיה לוגיסטית. פסי שגיאה מייצגים רווחי סמך של 95%.
יחסי הסיכויים מתארים את ההבדל בפוריות עם רשתות יתושים מהדור החדש בהשוואה לרשתות פירטרואיד בלבד. הקו המקווקו מייצג יחס של 1, המצביע על שום הבדל בפוריות. יחסי סיכויים< 1 מצביע על ירידה גדולה יותר בפוריות עם רשתות מהדור החדש. נתונים עבור רשתות יתושים מהדור החדש נאספו על פני ניסויים כדי לייצר אומדן יחיד של היעילות. פסי שגיאה מייצגים רווחי סמך של 95%.
זמן פרסום: 17-2-2025