הירידה האחרונה בנטל המלריה בחוף השנהב נובעת בעיקר מהשימוש ברשתות קוטלי חרקים ארוכות טווח (LIN).עם זאת, התקדמות זו מאוימת על ידי עמידות לקוטלי חרקים, שינויים התנהגותיים באוכלוסיות Anopheles gambiae ושארית העברה של מלריה, המחייבים את הצורך בכלים נוספים.לכן, מטרת מחקר זה הייתה להעריך את היעילות של שימוש משולב ב-LLIN ו-Bacillus thuringiensis (Bti) ולהשוות אותו עם LLIN.
המחקר נערך ממרץ 2019 עד פברואר 2020 על פני שתי זרועות מחקר (זרוע LLIN + Bti וזרוע LLIN בלבד) באזור הבריאות Korhogo בצפון חוף השנהב.בקבוצת LLIN + Bti טופלו בתי הגידול של זחל אנופלס ב-Bti כל שבועיים בנוסף ל-LLIN.יתושים זחלים ויתושים בוגרים נאספו וזוהו מורפולוגית לסוג ולמינים בשיטות סטנדרטיות.חבר אן.הקומפלקס הגמבי נקבע באמצעות טכנולוגיית תגובת שרשרת פולימראז.זיהום בפלסמודיום אן.כמו כן הוערכה שכיחות המלריה בגמביה ובאוכלוסייה המקומית.
בסך הכל, Anopheles spp.צפיפות הזחלים הייתה נמוכה יותר בקבוצת LLIN + Bti בהשוואה לקבוצת LLIN בלבד 0.61 [95% CI 0.41-0.81] זחלים/צלילה (l/צלילה) 3.97 [95% CI 3.56-4 .38] l/צלילה (RR = 6.50; CI 95% 5.81–7.29 P < 0.001).מהירות נשיכה כללית של An.השכיחות של עקיצות S. gambiae הייתה 0.59 [95% CI 0.43-0.75] לאדם ללילה בקבוצת LLIN + Bti בלבד, בהשוואה ל-2.97 [95% CI 2.02-3.93] נשיכות לאדם/לילה בקבוצת LLIN בלבד (P < 0.001).Anopheles gambiae sl מזוהה בעיקר בתור יתוש אנופלס.Anopheles gambiae (ss) (95.1%; n = 293), ואחריו Anopheles gambiae (4.9%; n = 15).מדד הדם האנושי באזור המחקר היה 80.5% (n = 389).ה-EIR עבור קבוצת LLIN + Bti היה 1.36 עקיצות נגועות לאדם בשנה (ib/p/y), בעוד שה-EIR עבור קבוצת LLIN בלבד היה 47.71 IB/p/y.שכיחות המלריה ירדה בחדות מ-291.8‰ (n=765) ל-111.4‰ (n=292) בקבוצת LLIN + Bti (P <0.001).
השילוב של LLIN ו-Bti הפחית משמעותית את שכיחות המלריה.השילוב של LLIN ו-Bti עשוי להיות גישה משולבת מבטיחה לשליטה יעילה ב-An.גמביה נקייה ממלריה.
למרות ההתקדמות בשליטה במלריה בעשורים האחרונים, נטל המלריה נותר בעיה מרכזית באפריקה שמדרום לסהרה [1].ארגון הבריאות העולמי (WHO) דיווח לאחרונה כי היו 249 מיליון מקרי מלריה וכ-608,000 מקרי מוות הקשורים למלריה ברחבי העולם בשנת 2023 [2].אזור אפריקה של ארגון הבריאות העולמי מהווה 95% ממקרי המלריה בעולם ו-96% ממקרי המוות ממלריה, כאשר נשים הרות וילדים מתחת לגיל 5 נפגעים ביותר [2, 3].
רשתות קוטלי חרקים ארוכות טווח (LLIN) וריסוס שיורי פנים (IRS) מילאו תפקיד מפתח בהפחתת נטל המלריה באפריקה [4].הרחבת כלי בקרת וקטור המלריה הללו הביאה לירידה של 37% בשכיחות המלריה ולירידה של 60% בתמותה בין השנים 2000 ל-2015 [5].עם זאת, מגמות שנצפו מאז 2015 נעצרו בצורה מדאיגה או אפילו מואצת, כאשר מקרי המוות ממלריה נותרו גבוהים באופן בלתי מתקבל על הדעת, במיוחד באפריקה שמדרום לסהרה [3].מספר מחקרים זיהו את הופעתה והתפשטות העמידות בקרב וקטור המלריה העיקרי אנופלס לקוטלי חרקים המשמשים בבריאות הציבור כמחסום ליעילות העתידית של LLIN ו-IRS [6,7,8].בנוסף, שינויים בהתנהגות הנשיכה הווקטורית בחוץ ובלילה מוקדם יותר אחראים לשיורי העברת מלריה ומהווים דאגה גוברת [9, 10].מגבלות של LLIN ו-IRS בשליטה על הווקטורים האחראים להעברה שיורית הן מגבלה עיקרית של מאמצי חיסול המלריה הנוכחיים [11].בנוסף, התמשכות המלריה מוסברת על ידי תנאי אקלים ופעילויות אנושיות, התורמות ליצירת בית גידול זחל [12].
ניהול מקור הזחל (LSM) הוא גישה מבוססת אתר רבייה לבקרת וקטור שמטרתה להפחית את מספר אתרי הרבייה ואת מספר זחלי היתושים והגלמים הכלולים בהם [13].LSM הומלץ על ידי מספר מחקרים כאסטרטגיה משולבת נוספת לבקרת וקטור מלריה [14, 15].למעשה, היעילות של LSM מספקת תועלת כפולה נגד עקיצות של מיני וקטור מלריה הן בפנים והן בחוץ [4].בנוסף, בקרת וקטור עם LSMs מבוססי קוטלי זחלים כגון Bacillus thuringiensis israelensis (Bti) יכולה להרחיב את מגוון אפשרויות השליטה במלריה.מבחינה היסטורית, LSM מילא תפקיד מפתח בשליטה מוצלחת במלריה בארצות הברית, ברזיל, מצרים, אלג'יריה, לוב, מרוקו, תוניסיה וזמביה [16,17,18].למרות ש-LSM מילא תפקיד חשוב בהדברה משולבת של מזיקים במדינות מסוימות שהכחידו את המלריה, ה-LSM לא השתלב באופן נרחב במדיניות ובנוהלי הדברה של וקטור מלריה באפריקה, והוא משמש רק בתוכניות הדברת וקטורים בחלק ממדינות שמדרום לסהרה.מדינות [14,15,16,17,18,19].אחת הסיבות לכך היא האמונה הרווחת שאתרי רבייה רבים מדי וקשים לאיתור, מה שהופך את LSM ליקר מאוד ליישום [4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 13, 14].לכן, ארגון הבריאות העולמי המליץ במשך עשרות שנים על משאבים המגויסים לבקרת וקטור מלריה להתמקד ב-LLIN וב-IRS [20, 21].רק בשנת 2012 המליץ ארגון הבריאות העולמי על שילוב של LSM, במיוחד התערבויות Bti, כהשלמה ל-LLIN ו-IRS במסגרות מסוימות באפריקה שמדרום לסהרה [20].מאז מתן המלצה זו של WHO, נערכו מספר מחקרי פיילוט על היתכנות, יעילות ועלות של קוטלי זחלים באפריקה שמדרום לסהרה, המדגימים את היעילות של LSM בהפחתת צפיפות היתושים של אנופלס ויעילות העברת המלריה במונחים של [22, 23].., 24].
חוף השנהב היא בין 15 המדינות עם עומס המלריה הגבוה בעולם [25].שכיחות המלריה בחוף השנהב מייצגת 3.0% מנטל המלריה העולמי, כאשר שכיחות ומספר מקרים משוערים נעים בין 300 ליותר מ-500 לכל 1000 תושבים [25].למרות העונה היבשה הארוכה מנובמבר עד מאי, המלריה מתפשטת לאורך כל השנה באזור הסוואנה הצפונית של המדינה [26].העברת מלריה באזור זה קשורה לנוכחות של מספר רב של נשאים אסימפטומטיים של Plasmodium falciparum [27].באזור זה, וקטור המלריה הנפוץ ביותר הוא Anopheles Gambiae (SL).אבטחה מקומית.יתושי Anopheles gambiae מורכבים בעיקר מ-Anopheles gambiae (SS), אשר עמידים מאוד בפני קוטלי חרקים ולכן מהווה סיכון גבוה להדבקה שארית של מלריה [26].לשימוש ב-LLIN עשויה להיות השפעה מוגבלת על הפחתת העברת המלריה עקב עמידות קוטלי חרקים של וקטורים מקומיים ולכן הוא נותר תחום מדאיג.מחקרי פיילוט באמצעות Bti או LLIN הראו יעילות בהפחתת צפיפות וקטור יתושים בצפון חוף השנהב.עם זאת, אף מחקר קודם לא העריך את ההשפעה של יישומים חוזרים ונשנים של Bti בשילוב עם LLIN על העברת מלריה ושכיחות המלריה באזור זה.לכן, מחקר זה נועד להעריך את ההשפעה של השימוש המשולב ב-LLIN ו-Bti על העברת מלריה על ידי השוואת קבוצת LLIN + Bti עם קבוצת LLIN בלבד בארבעה כפרים באזור הצפוני של חוף השנהב.ההשערה הייתה שיישום LSM מבוסס Bti על גבי LLIN יוסיף ערך על ידי הפחתה נוספת של צפיפות יתושי המלריה בהשוואה ל-LLIN בלבד.גישה משולבת זו, המכוונת ליתושי אנופלס לא בוגרים הנושאים Bti ויתושי אנופלס בוגרים הנושאים LLIN, עשויה להיות קריטית להפחתת העברת המלריה באזורים עם אנדמיות גבוהה של מלריה, כגון כפרים בצפון חוף השנהב.לכן, התוצאות של מחקר זה עשויות לסייע להחליט אם לכלול LSM בתוכניות לאומיות לבקרת וקטור מלריה (NMCPs) במדינות אנדמיות שמדרום לסהרה.
המחקר הנוכחי בוצע בארבעה כפרים של המחלקה של Napieldougou (הידועה גם בשם Napier) באזור הסניטרי Korhogo בצפון חוף השנהב (איור 1).כפרים במחקר: Kakologo (9° 14′ 2″ N, 5° 35′ 22″ E), Kolekakha (9° 17′ 24″ N, 5° 31′ 00″ E .), Lofinekaha (9° 17′ 31 ″).) 5° 36′ 24″ N) ו- Nambatiurkaha (9° 18′ 36″ N, 5° 31′ 22″ E).אוכלוסיית נפיירלדוגאו בשנת 2021 הוערכה ב-31,000 תושבים, והמחוז מורכב מ-53 כפרים עם שני מרכזי בריאות [28].במחוז Napyeledougou, שבו מלריה היא הגורם המוביל לביקורים רפואיים, אשפוז ותמותה, רק LLIN משמש כדי לשלוט בוקטורים של אנופלס [29].כל ארבעת הכפרים בשתי קבוצות המחקר משרתים על ידי אותו מרכז בריאות, אשר הרישומים הקליניים של מקרי המלריה נסקרו במחקר זה.
מפה של חוף השנהב המציגה את אזור המחקר.(מקור מפה ותוכנה: נתוני GADM ו-ArcMap 10.6.1. רשת קוטל חרקים עמידה לאורך זמן LLIN, Bti Bacillus thuringiensis israelensis
שכיחות המלריה בקרב אוכלוסיית היעד של מרכז הבריאות Napier הגיעה ל-82.0% (2038 מקרים) (נתוני טרום Bti).בכל ארבעת הכפרים, משקי בית משתמשים רק ב-PermaNet® 2.0 LLIN, המופץ על ידי ה-NMCP של השנהב ב-2017, עם כיסוי של יותר מ-80% [25, 26, 27, 28, 30].הכפרים שייכים לאזור קורחוגו, המשמש כנקודת תצפית למועצה הצבאית הלאומית של חוף השנהב ונגיש כל השנה.בכל אחד מארבעת הכפרים יש לפחות 100 משקי בית ואותה אוכלוסייה בקירוב, ולפי מרשם הבריאות (מסמך עבודה של משרד הבריאות של חוף השנהב), מדווחים כמה מקרים של מלריה מדי שנה.המלריה נגרמת בעיקר על ידי Plasmodium falciparum (P. falciparum) ומועברת לבני אדם על ידי Plasmodium.גמביה מועברת גם על ידי יתושי אנופלס ואנופלס נילי באזור [28].מתחם מקומי An.גמביה מורכבת בעיקר מיתושי אנופלס.ל-gambiae ss יש תדירות גבוהה של מוטציות kdr (טווח תדירות: 90.70-100%) ותדירות מתונה של אללים של ace-1 (טווח תדירות: 55.56-95%) [29].
כמות המשקעים השנתית הממוצעת והטמפרטורה נעה בין 1200 ל-1400 מ"מ ו-21 עד 35 מעלות צלזיוס בהתאמה, והלחות היחסית (RH) מוערכת ב-58%.באזור המחקר הזה יש אקלים מסוג סודני עם עונה יבשה של 6 חודשים (נובמבר עד אפריל) ועונה רטובה של 6 חודשים (מאי עד אוקטובר).האזור חווה חלק מההשפעות של שינויי אקלים, כמו אובדן צמחייה ועונה יבשה ארוכה יותר, המאופיינת בייבוש של מקווי מים (שפלה, שדות אורז, בריכות, שלוליות) שיכולים לשמש כבית גידול לזחלי יתוש אנופלס. .יתושים[26].
המחקר נערך בקבוצת LLIN + Bti, המיוצגת על ידי הכפרים קקולוגו ונמבטיורקהה, ובקבוצת LLIN היחידה, המיוצגת על ידי הכפרים קולקהה ולופינקהה.במהלך תקופת המחקר הזה, אנשים בכל הכפרים האלה השתמשו רק ב-PermaNet® 2.0 LLIN.
היעילות של LLIN (PermaNet 2.0) בשילוב עם Bti נגד יתושים של אנופלס והעברת מלריה הוערכה בניסוי אקראי מבוקר (RCT) עם שתי זרועות מחקר: קבוצת LLIN + Bti (קבוצת טיפול) וקבוצת LLIN בלבד (קבוצת ביקורת ).שרוולי LLIN + Bti מיוצגים על ידי Kakologo ו- Nambatiourkaha, בעוד Kolékaha ו-Lofinékaha עוצבו ככתפיים LLIN בלבד.בכל ארבעת הכפרים, תושבים מקומיים משתמשים ב-LLIN PermaNet® 2.0 שהתקבל מ-NMCP של חוף השנהב בשנת 2017. ההנחה היא שהתנאים לשימוש ב-PermaNet® 2.0 זהים בכפרים שונים מכיוון שהם קיבלו את הרשת באותו אופן..בקבוצת LLIN + Bti טופלו בתי הגידול של זחל אנופלס ב-Bti כל שבועיים בנוסף ל-LLIN שכבר נמצא בשימוש האוכלוסייה.בתי גידול זחלים בתוך כפרים וברדיוס של 2 ק"מ ממרכז כל כפר טופלו בהתאם להמלצות ארגון הבריאות העולמי וה-NMCP של חוף השנהב [31].לעומת זאת, קבוצת ה-LLIN בלבד לא קיבלה טיפול Bti קוטל זחלים במהלך תקופת המחקר.
צורה גרגירית מתפזרת במים של Bti (Vectobac WG, 37.4% משקל; חבילה מספר 88–916-PG; 3000 International Toxcity Units IU/mg; Valent BioScience Corp, ארה"ב) שימשה במינון של 0.5 מ"ג/ליטר..השתמש במרסס תרמיל 16 ליטר ובאקדח ריסוס פיברגלס עם ידית ופייה מתכווננת בקצב זרימה של 52 מ"ל לשנייה (3.1 ליטר לדקה).להכנת נבולייזר המכיל 10 ליטר מים, כמות ה-Bti המדולל בתרחיף היא 0.5 מ"ג/ליטר × 10 ליטר = 5 מ"ג.לדוגמה, עבור אזור עם זרימת מים מעוצבת של 10 ליטר, באמצעות מרסס 10 ליטר לטיפול בנפח מים, כמות ה-Bti שצריך לדלל היא 0.5 מ"ג/ליטר × 20 ל' = 10 מ"ג.10 מ"ג Bti נמדדו בשטח באמצעות משקל אלקטרוני.בעזרת מרית, הכן תמיסה על ידי ערבוב כמות זו של Bti בדלי מדורג של 10 ליטר.מינון זה נבחר לאחר ניסויי שדה של היעילות של Bti נגד אינסטארים שונים של Anopheles spp.ו- Culex spp.בתנאים טבעיים באזור שונה, אך דומה לתחום המחקר המודרני [32].שיעור היישום של תרחיף קוטל הזחל ומשך היישום עבור כל אתר רבייה חושבו על סמך נפח המים המשוער באתר הרבייה [33].יש למרוח את Bti באמצעות מרסס ידני מכויל.נבולייזרים מכוילים ונבדקים במהלך תרגילים בודדים ובאזורים שונים כדי להבטיח את הכמות הנכונה של Bti.
כדי למצוא את הזמן הטוב ביותר לטיפול באתרי רבייה של זחלים, הצוות זיהה ריסוס חלונות.חלון ההתזה הוא התקופה בה מורחים מוצר להשגת יעילות מיטבית: במחקר זה, חלון ההתזה נע בין 12 שעות לשבועיים, בהתאם להתמדה של Bti.ככל הנראה, קליטת Bti על ידי זחלים באתר הרבייה דורשת פרק זמן מ-7:00 עד 18:00.בדרך זו ניתן למנוע תקופות של גשם חזק כאשר גשם פירושו הפסקת הריסוס והפעלה מחדש למחרת אם מזג האוויר משתף פעולה.תאריכי הריסוס ותאריכים ושעות מדויקים תלויים בתנאי מזג האוויר שנצפו.כדי לכייל מרססים לתרמיל עבור קצב יישום ה-Bti הרצוי, כל טכנאי מאומן לבדוק חזותית ולכוון את פיית המרסס ולשמור על לחץ.הכיול הושלם על ידי וידוא שהכמות הנכונה של טיפול Bti מיושמת באופן שווה ליחידת שטח.טפלו בבית הגידול של הזחלים כל שבועיים.פעילויות קוטל זחלים מתבצעות בתמיכתם של ארבעה מומחים מנוסים ומאומנים היטב.הפעילויות והמשתתפים של קוטל זחלים מפוקחים על ידי מפקחים מנוסים.טיפול קוטל זחלים החל במרץ 2019 במהלך העונה היבשה.למעשה, מחקר קודם הראה כי העונה היבשה היא התקופה המתאימה ביותר להתערבות קוטל זחל בשל יציבותם של אתרי הרבייה והירידה בשפעם [27].הדברת זחלים בעונה היבשה צפויה למנוע משיכת יתושים בעונה הרטובה.שני (02) קילוגרם של BTI בעלות של 99.29 דולר ארה"ב מאפשרים לקבוצת המחקר המקבלת טיפול לכסות את כל האזורים.בקבוצת LLIN+Bti, התערבות קוטל זחלים נמשכה שנה שלמה, ממרץ 2019 עד פברואר 2020. בסך הכל התרחשו 22 מקרים של טיפול קוטל זחלים בקבוצת LLIN + Bti.
תופעות לוואי פוטנציאליות (כגון גירוד, סחרחורת או נזלת) נוטרו באמצעות סקרים פרטניים של nebulizers biolarvicide Bti ותושבי משק הבית המשתתפים בקבוצת LIN + Bti.
סקר משקי בית נערך בקרב 400 משקי בית (200 משקי בית לכל קבוצת מחקר) כדי להעריך את אחוז השימוש ב-LLIN בקרב האוכלוסייה.כאשר בודקים משקי בית משתמשים בשיטת שאלון כמותית.שכיחות השימוש ב-LLIN חולקה לשלוש קבוצות גיל: 15 שנים.השאלון הושלם והוסבר בשפת Senoufo המקומית לראש משק הבית או למבוגר אחר מעל גיל 18.
הגודל המינימלי של משק הבית שנסקר חושב באמצעות הנוסחה שתוארה על ידי ווהן ומורו [34].
n הוא גודל המדגם, e הוא מרווח הטעות, t הוא מקדם הבטיחות הנגזר מרמת הביטחון, ו-p הוא החלק של הורי האוכלוסייה עם התכונה הנתונה.לכל אלמנט של השבר יש ערך עקבי, ולכן (t) = 1.96;גודל משק הבית המינימלי במצב זה בסקר עמד על 384 משקי בית.
לפני הניסוי הנוכחי, זוהו, נדגמו, תוארו, סומנו גיאוגרפיים ותויגו סוגי בתי גידול שונים לזחלי אנופלס בקבוצות LLIN+Bti ו-LLIN.השתמש בסרט מדידה כדי למדוד את גודל מושבת הקינון.לאחר מכן הוערכה צפיפות זחלי היתושים מדי חודש במשך 12 חודשים ב-30 אתרי רבייה שנבחרו באקראי לכל כפר, עבור סך של 60 אתרי רבייה לכל קבוצת מחקר.היו 12 דגימות זחלים לכל אזור מחקר, המקבילות ל-22 טיפולי Bti.המטרה של בחירת 30 אתרי הרבייה הללו לכל כפר הייתה ללכוד מספר מספיק של אתרי איסוף זחלים על פני כפרים ויחידות לימוד כדי למזער את ההטיה.הזחלים נאספו על ידי טבילה בכף של 60 מ"ל [35].בשל העובדה שחלק מהמשתלות קטנות מאוד ורדודות, יש צורך להשתמש בדלי קטן מלבד הדלי הסטנדרטי של WHO (350 מ"ל).בסך הכל בוצעו 5, 10 או 20 צלילות מאתרי קינון בהיקף של 10 מ', בהתאמה.זיהוי מורפולוגי של זחלים שנאספו (למשל אנופלס, קולקס ואדס) בוצע ישירות בשטח [36].הזחלים שנאספו חולקו לשתי קטגוריות בהתאם לשלב ההתפתחותי: זחלים בשלבים מוקדמים (שלבים 1 ו-2) וזחלים בשלבים 3 ו-4 מאוחרים [37].הזחלים נספרו לפי סוגים ובכל שלב התפתחותי.לאחר הספירה, זחלי היתושים מוכנסים מחדש לאזורי הרבייה שלהם ומתחדשים לנפחם המקורי במי מקור בתוספת מי גשמים.
אתר רבייה נחשב חיובי אם נוכח לפחות זחל או גולם אחד מכל מיני יתושים.צפיפות הזחל נקבעה על ידי חלוקת מספר הזחלים מאותו הסוג במספר הצלילות.
כל מחקר נמשך יומיים רצופים, ומדי חודשיים נאספו יתושים בוגרים מ-10 משקי בית שנבחרו באקראי מכל כפר.במהלך המחקר, כל צוות מחקר ערך סקרים מדגמיים של 20 משקי בית בשלושה ימים רצופים.יתושים נלכדו באמצעות מלכודות חלונות סטנדרטיות (WT) ומלכודות ריסוס pyrethrum (PSC) [38, 39].בתחילה, כל הבתים בכל כפר היו ממוספרים.ארבעה בתים בכל כפר נבחרו אז באקראי כנקודות איסוף ליתושים בוגרים.בכל בית שנבחר באקראי נאספו יתושים מחדר השינה הראשי.לחדרי השינה הנבחרים יש דלתות וחלונות והם היו תפוסים בלילה הקודם.חדרי השינה נשארים סגורים לפני תחילת העבודה ובמהלך איסוף היתושים כדי למנוע מעוף יתושים מהחדר.WT הותקן בכל חלון של כל חדר שינה כנקודת דגימת יתושים.למחרת, יתושים שנכנסו למקום העבודה מחדרי השינה נאספו בין השעות 06:00-08:00 בבוקר.אסוף יתושים מאזור העבודה שלך באמצעות פיה ואחסן אותם בכוס נייר חד פעמית מכוסה בחתיכה גולמית.כילה נגד יתושים.יתושים שנחו באותו חדר שינה נלכדו מיד לאחר איסוף WT באמצעות PSC מבוסס פירטרואידים.לאחר פיזור סדינים לבנים על רצפת חדר השינה יש לסגור את הדלתות והחלונות ולרסס קוטל חרקים (מרכיבים פעילים: 0.25% טרנספלוטרין + 0.20% פרמטרין).כ-10 עד 15 דקות לאחר הריסוס, הסר את כיסוי המיטה מחדר השינה המטופל, השתמש בפינצטה כדי לאסוף את כל היתושים שנחתו על הסדינים הלבנים, ואחסנו אותם בצלחת פטרי מלאה בצמר גפן ספוג במים.כמו כן נרשם מספר האנשים שבילו את הלילה בחדרי השינה הנבחרים.יתושים שנאספו מועברים במהירות למעבדה באתר לעיבוד נוסף.
במעבדה, כל היתושים שנאספו זוהו מורפולוגית לפי סוג ומין [36].השחלות של אנה.gambiae SL באמצעות מיקרוסקופ לנתח משקפת עם טיפת מים מזוקקים הניח על שקופית זכוכית [35].סטטוס זוגיות הוערך כדי להפריד בין נשים מרובות נשים לנשים בטלניות על סמך מורפולוגיה של השחלות וקנה הנשימה, וכן כדי לקבוע את שיעור הפריון והגיל הפיזיולוגי [35].
האינדקס היחסי נקבע על ידי בדיקת המקור של ארוחת דם טרייה שנאספה.גמביה על ידי בדיקת אימונוסורבנט מקושרת אנזים (ELISA) תוך שימוש בדם מבני אדם, מבעלי חיים (בקר, כבשים, עיזים) ומארחי תרנגולות [40].זיהום אנטומולוגי (EIR) חושב באמצעות An.הערכות של נשים SL בגמביה [41] בנוסף, An.הדבקה ב- Plasmodium gambiae נקבעה על ידי ניתוח הראש והחזה של נקבות מרובות בשיטת circumsporozoite antigen ELISA (CSP ELISA) [40].לבסוף, יש את חברי אן.גמביה זוהתה על ידי ניתוח הרגליים, הכנפיים והבטן שלה באמצעות טכניקות של תגובת שרשרת פולימראז (PCR) [34].
נתונים קליניים על מלריה התקבלו ממרשם הייעוץ הקליני של מרכז הבריאות Napyeledugou, המכסה את כל ארבעת הכפרים הנכללים במחקר זה (כלומר Kakologo, Kolekaha, Lofinekaha ו- Nambatiurkaha).סקירת הרישום התמקדה ברשומות ממרץ 2018 עד פברואר 2019 וממרץ 2019 עד פברואר 2020. נתונים קליניים ממארס 2018 עד פברואר 2019 מייצגים נתוני התערבות בסיס או טרום Bti, ואילו נתונים קליניים ממרץ 2019 עד פברואר 2020 מייצגים טרום Bti נתוני התערבות.נתונים לאחר התערבות Bti.מידע קליני, גיל וכפר של כל חולה בקבוצות המחקר LLIN+Bti ו-LLIN נאספו במרשם הבריאות.עבור כל חולה נרשם מידע כגון מוצא הכפר, גיל, אבחנה ופתולוגיה.במקרים שנסקרו במחקר זה, המלריה אושרה על ידי מבחן אבחון מהיר (RDT) ו/או מיקרוסקופיה של מלריה לאחר מתן טיפול משולב מבוסס ארטמיסינין (ACT) על ידי ספק שירותי בריאות.מקרי המלריה חולקו לשלוש קבוצות גיל (כלומר 15 שנים).השכיחות השנתית של מלריה לכל 1000 תושבים נאמדה על ידי חלוקת שכיחות המלריה ל-1000 תושבים באוכלוסיית הכפר.
נתונים שנאספו במחקר זה הוכנסו פעמיים למסד נתונים של Microsoft Excel ולאחר מכן יובאו לתוכנת הקוד הפתוח R [42] גרסה 3.6.3 לצורך ניתוח סטטיסטי.החבילה ggplot2 משמשת לציור עלילות.נעשה שימוש במודלים ליניאריים מוכללים באמצעות רגרסיה של Poisson כדי להשוות את צפיפות הזחלים ואת המספר הממוצע של עקיצות יתושים לאדם ללילה בין קבוצות המחקר.מדידות יחס רלוונטיות (RR) שימשו להשוואת צפיפות זחלים ממוצעת ושיעורי עקיצות של יתושי Culex ואנופלס.Gambia SL הוצב בין שתי קבוצות המחקר תוך שימוש בקבוצת LLIN + Bti בתור הבסיס.גדלי ההשפעה הובאו כיחסי סיכויים ורווחי סמך של 95% (95% CI).היחס (RR) של מבחן Poisson שימש להשוואת הפרופורציות ושיעורי ההיארעות של מלריה לפני ואחרי התערבות Bti בכל קבוצת מחקר.רמת המובהקות שבה נעשה שימוש הייתה 5%.
פרוטוקול המחקר אושר על ידי הוועדה הלאומית לאתיקה במחקר של משרד הבריאות ובריאות הציבור של חוף השנהב (N/Ref: 001//MSHP/CNESVS-kp), וכן על ידי מחוז הבריאות האזורי והמינהל של קורהוגו.לפני איסוף זחלי יתושים ומבוגרים, התקבלה הסכמה מדעת חתומה ממשתתפי סקר ביתי, בעלים ו/או דיירים.נתונים משפחתיים וקליניים הם אנונימיים וסודיים וזמינים רק לחוקרים ייעודיים.
בסך הכל ביקרו 1198 אתרי קינון.מתוך אתרי הקינים שנסקרו באזור המחקר, 52.5% (n = 629) השתייכו לקבוצת LLIN + Bti ו-47.5% (n = 569) לקבוצת LLIN בלבד (RR = 1.10 [95% CI 0 .98–1.24 ], P = 0.088).באופן כללי, בתי הגידול של הזחלים המקומיים סווגו ל-12 סוגים, ביניהם החלק הגדול ביותר של בתי הגידול של הזחלים היו שדות אורז (24.5%, n=294), ואחריהם ניקוז סערה (21.0%, n=252) וכלי חרס (8.3).%, n = 99), גדת הנהר (8.2%, n = 100), שלולית (7.2%, n = 86), שלולית (7.0%, n = 84), משאבת מים בכפר (6.8%, n = 81), טביעות פרסה (4.8%, n = 58), ביצות (4.0%, n = 48), כדים (5.2%, n = 62), בריכות (1.9%, n = 23) ובארות (0.9%, n = 11) .).
בסך הכל, 47,274 זחלי יתושים נאספו מאזור המחקר, עם שיעור של 14.4% (n = 6,796) בקבוצת LLIN + Bti לעומת 85.6% (n = 40,478) בקבוצת LLIN בלבד ((RR = 5.96) [95% CI 5.80-6.11], P ≤ 0.001).זחלים אלה מורכבים משלושה סוגים של יתושים, המין השולט הוא אנופלס.(48.7%, n = 23,041), ואחריו Culex spp.(35.0%, n = 16,562) ו-Aedes spp.(4.9%, n = 2340).גלמים היוו 11.3% מהזבובים הלא בוגרים (n = 5344).
צפיפות ממוצעת כוללת של Anopheles spp.זחלים.במחקר זה, מספר הזחלים לכל סקופ היה 0.61 [95% CI 0.41-0.81] L/dip בקבוצת LLIN + Bti ו-3.97 [95% CI 3.56-4.38] L/צלילה בקבוצת LLIN בלבד (אופציונלי).קובץ 1: איור S1).צפיפות ממוצעת של Anopheles spp.קבוצת LLIN לבדה הייתה גבוהה פי 6.5 מקבוצת LLIN + Bti (HR = 6.49; 95% CI 5.80-7.27; P <0.001).לא זוהו יתושי אנופלס במהלך הטיפול.הזחלים נאספו בקבוצת LLIN + Bti החל מינואר, בהתאמה לטיפול ה-Bti העשרים.בקבוצת LLIN + Bti חלה ירידה משמעותית בצפיפות הזחל בשלב מוקדם ומאוחר.
לפני תחילת הטיפול ב-Bti (מרץ), הצפיפות הממוצעת של יתושי אנופלס בשלב מוקדם הוערכה כ-1.28 [95% CI 0.22-2.35] L/צלילה בקבוצת LLIN + Bti ו-1.37 [95% CI 0.36-2.36] l/צלילה בקבוצת LLIN + Bti.l/טבילה./ לטבול רק את זרוע LLIN (איור 2A).לאחר יישום הטיפול ב-Bti, הצפיפות הממוצעת של יתושי אנופלס מוקדמים בקבוצת LLIN + Bti ירדה באופן הדרגתי מ-0.90 [95% CI 0.19-1.61] ל-0.10 [95% CI – 0.03-0.18] l/dip.צפיפות הזחלים של Anopheles בשלב מוקדם נותרה נמוכה בקבוצת LLIN + Bti.בקבוצת LLIN בלבד, תנודות בשפע של Anopheles spp.זחלים בשלב מוקדם נצפו עם צפיפות ממוצעת שנעה בין 0.23 [95% CI 0.07-0.54] L/צלילה ל-2.37 [95% CI 1.77-2.98] L/צלילה.בסך הכל, הצפיפות הממוצעת של זחלי אנופלס מוקדמים בקבוצת LLIN בלבד הייתה גבוהה יותר סטטיסטית ב-1.90 [95% CI 1.70-2.10] L/צלילה, בעוד שהצפיפות הממוצעת של זחלי אנופלס מוקדמים בקבוצת LLIN הייתה 0.38 [95% CI 0.28] –0.47]) ליטר/טבילה.+ קבוצת Bti (RR = 5.04; CI 95% 4.36-5.85; P <0.001).
שינויים בצפיפות הממוצעת של זחלי אנופלס.כילות נגד יתושים מוקדם (A) ומאוחר בשלב (B) בקבוצת מחקר ממרץ 2019 עד פברואר 2020 באזור Napier, צפון חוף השנהב.LLIN: רשת קוטל חרקים עמידה Bti: Bacillus thuringiensis, ישראל TRT: טיפול;
צפיפות ממוצעת של Anopheles spp.זחלים.גיל מאוחר בקבוצת LLIN + Bti.צפיפות ה-Bti לפני הטיפול הייתה 2.98 [95% CI 0.26-5.60] L/dip, בעוד שהצפיפות בקבוצת ה-LLIN לבד הייתה 1.46 [95% CI 0.26-2.65] ליום לאחר יישום Bti, הצפיפות של הזחלים של אנופלס בקבוצת LLIN + Bti ירדו מ-0.22 [95% CI 0.04-0.40] ל-0.03 [95% CI 0.00-0.06] L/dip (איור 2B).בקבוצת LLIN בלבד, הצפיפות של זחלי האנופלס המאוחרים עלתה מ-0.35 [95% CI - 0.15-0.76] ל-2.77 [95% CI 1.13-4.40] ליטר/צלילה עם כמה שינויים בצפיפות הזחלים בהתאם לתאריך הדגימה.הצפיפות הממוצעת של זחלי Anopheles בשלב מאוחר בקבוצת LLIN בלבד הייתה 2.07 [95% CI 1.84-2.29] L/צלילה, פי תשעה מ-0.23 [95% CI 0.11-0.36] ליטר/טבילה ב-LLIN.+ קבוצת Bti (RR = 8.80; CI 95% 7.40-10.57; P <0.001).
צפיפות ממוצעת של Culex spp.הערכים היו 0.33 [95% CI 0.21-0.45] L/dip בקבוצת LLIN + Bti ו-2.67 [95% CI 2.23-3.10] L/dip בקבוצת LLIN בלבד (קובץ נוסף 2: איור S2).צפיפות ממוצעת של Culex spp.קבוצת LLIN בלבד הייתה גבוהה משמעותית מקבוצת LLIN + Bti (HR = 8.00; 95% CI 6.90-9.34; P <0.001).
צפיפות ממוצעת של הסוג Culex Culex spp.לפני הטיפול, Bti l/dip היה 1.26 [95% CI 0.10-2.42] l/dip בקבוצת LLIN + Bti ו-1.28 [95% CI 0.37-2.36] בקבוצה היחידה LLIN (איור 3A).לאחר יישום הטיפול ב-Bti, הצפיפות של זחלי קולקס מוקדמים ירדה מ-0.07 [95% CI - 0.001-0.] ל-0.25 [95% CI 0.006-0.51] L/dip.לא נאספו זחלי קולקס מבתי גידול זחלים שטופלו ב-Bti החל מדצמבר.הצפיפות של זחלי Culex המוקדמים ירדה ל-0.21 [95% CI 0.14-0.28] L/dip בקבוצת LLIN + Bti, אך הייתה גבוהה יותר בקבוצת LLIN בלבד ב-1.30 [95% CI 1.10-1.50] ליטר/טבילה.טיפה/ד.הצפיפות של זחלי Culex המוקדמים בקבוצת LLIN בלבד הייתה גבוהה פי 6 מאשר בקבוצת LLIN + Bti (RR = 6.17; 95% CI 5.11-7.52; P <0.001).
שינויים בצפיפות הממוצעת של Culex spp.זחלים.ניסויים לחיים מוקדמים (A) ותחילת חיים (B) בקבוצת מחקר ממרץ 2019 עד פברואר 2020 באזור Napier, צפון חוף השנהב.רשת קוטל חרקים לאורך זמן LLIN, Bti Bacillus thuringiensis ישראל, טיפול Trt
לפני הטיפול ב-Bti, הצפיפות הממוצעת של זחלי Culex בשלב מאוחר בקבוצת LLIN + Bti ובקבוצת LLIN הייתה 0.97 [95% CI 0.09-1.85] ו-1.60 [95% CI - 0.16-3.37] ליטר/טבילה בהתאם (איור. 3B) ).צפיפות ממוצעת של מיני Culex בשלב מאוחר לאחר התחלת טיפול Bti.הצפיפות בקבוצת LLIN + Bti ירדה בהדרגה והייתה נמוכה מזו שבקבוצת LLIN בלבד, שנותרה גבוהה מאוד.הצפיפות הממוצעת של זחלי Culex בשלב מאוחרים הייתה 0.12 [95% CI 0.07-0.15] L/צלילה בקבוצת LLIN + Bti ו-1.36 [95% CI 1.11-1.61] L/צלילה בקבוצה בלבד.הצפיפות הממוצעת של זחלי Culex בשלב מאוחר יותר הייתה גבוהה משמעותית בקבוצת LLIN בלבד מאשר בקבוצת LLIN + Bti (RR = 11.19; 95% CI 8.83-14.43; P <0.001).
לפני הטיפול ב-Bti, הצפיפות הממוצעת של גלמים לכל פרת משה רבנו הייתה 0.59 [95% CI 0.24-0.94] בקבוצת LLIN + Bti ו-0.38 [95% CI 0.13-0.63] ב-LLIN בלבד (איור 4).צפיפות הגולם הכוללת הייתה 0.10 [95% CI 0.06-0.14] בקבוצת LLIN + Bti ו-0.84 [95% CI 0.75-0.92] בקבוצת LLIN בלבד.טיפול ב-Bti הפחית באופן משמעותי את צפיפות הגולם הממוצעת בקבוצת LLIN + Bti בהשוואה לקבוצת LLIN בלבד (OR = 8.30; CI 95% 6.37-11.02; P <0.001).בקבוצת LLIN + Bti לא נאספו גלמים לאחר נובמבר.
שינויים בצפיפות הממוצעת של גלמים.המחקר נערך ממרץ 2019 עד פברואר 2020 באזור Napier בצפון חוף השנהב.רשת קוטל חרקים לאורך זמן LLIN, Bti Bacillus thuringiensis ישראל, טיפול Trt
סך של 3456 יתושים בוגרים נאספו מאזור המחקר.יתושים שייכים ל-17 מינים של 5 סוגים (אנופלס, קולקס, אדס, ארטמפודיטים) (טבלה 1).בוקטורי מלריה An.gambiae sl היה המין השכיח ביותר עם שיעור של 74.9% (n = 2587), ואחריו An.gambiae sl.funestus (2.5%, n = 86) ו-An null (0.7%, n = 24).העושר של אנה.gambiae sl בקבוצת LLIN + Bti (10.9%, n = 375) היה נמוך יותר מאשר בקבוצת LLIN בלבד (64%, n = 2212).אין שלום.nli אנשים קובצו עם LLIN בלבד.עם זאת, An.גמביה ו-An.funestus היו נוכחים הן בקבוצת LLIN + Bti והן בקבוצת LLIN בלבד.
במחקרים שהתחילו לפני יישום Bti באתר הרבייה (3 חודשים), המספר הממוצע הכולל של יתושים ליליים לאדם (b/p/n) בקבוצת LLIN + Bti נאמד ב-0.83 [95% CI 0.50-1.17] , בעוד שבקבוצת LLIN + Bti זה היה 0.72 בקבוצת LLIN בלבד [95% CI 0.41-1.02] (איור 5).בקבוצת LLIN + Bti, הנזק ליתוש Culex פחת ונשאר נמוך למרות שיא של 1.95 [95% CI 1.35-2.54] bpp בספטמבר לאחר יישום Bti ה-12.עם זאת, בקבוצת LLIN בלבד, שיעור עקיצת היתושים הממוצע עלה בהדרגה לפני שהגיע לשיא בספטמבר ב-11.33 [95% CI 7.15-15.50] bp/n.השכיחות הכוללת של עקיצות יתושים הייתה נמוכה משמעותית בקבוצת LLIN + Bti בהשוואה לקבוצת LLIN בלבד בכל נקודת זמן במהלך המחקר (HR = 3.66; 95% CI 3.01-4.49; P <0.001).
שיעורי עקיצת חיית היתושים באזור המחקר של אזור נאפייר בצפון חוף השנהב ממרץ 2019 עד פברואר 2020 LLIN רשת קוטל חרקים עמידה, Bti Bacillus thuringiensis ישראל, טיפול ב-Trt, עקיצות ב/p/night/human/ לַיְלָה
Anopheles gambiae הוא וקטור המלריה הנפוץ ביותר באזור המחקר.מהירות נשיכה של An.בתחילת הדרך, לנשים גמביות היו ערכי b/p/n של 0.64 [95% CI 0.27-1.00] בקבוצת LLIN + Bti ו-0.74 [95% CI 0.30-1.17] בקבוצה רק LLIN (איור 6) .במהלך תקופת ההתערבות של Bti, פעילות הנשיכה הגבוהה ביותר נצפתה בספטמבר, המקבילה לקורס השנים-עשר של טיפול Bti, עם שיא של 1.46 [95% CI 0.87-2.05] b/p/n בקבוצת LLIN + Bti ו- שיא של 9 .65 [95% CI 0.87-2.05] w/n 5.23-14.07] קבוצת LLIN בלבד.מהירות נשיכה כללית של An.שיעור ההדבקה בגמביה היה נמוך משמעותית בקבוצת LLIN + Bti (0.59 [95% CI 0.43-0.75] b/p/n) מאשר בקבוצת LLIN בלבד (2.97 [95% CI 2, 02-3.93] b /p/no).(RR = 3.66; CI 95% 3.01-4.49; P <0.001).
מהירות הנשיכה של אנה.gambiae sl, יחידת מחקר באזור Napier, צפון חוף השנהב, ממרץ 2019 עד פברואר 2020 LLIN רשת מיטה עמידה מטופלת בקוטלי חרקים, Bti Bacillus thuringiensis ישראל, טיפול ב-Trt, עקיצות ב/p/לילה/ אדם/לילה
סך הכל 646 אמפר.גמביה מבותרת.בסך הכל, אחוז האבטחה המקומית.שיעורי הזוגיות בגמביה היו בדרך כלל מעל 70% לאורך כל תקופת המחקר, למעט יולי, שבו נעשה שימוש רק בקבוצת LLIN (קובץ נוסף 3: איור S3).עם זאת, שיעור הפריון הממוצע באזור המחקר היה 74.5% (n = 481).בקבוצת LLIN+Bti, שיעור השוויון נותר ברמה גבוהה, מעל 80%, למעט ספטמבר, אז ירד שיעור השוויון ל-77.5%.עם זאת, נצפו שינויים בשיעורי הפריון הממוצעים בקבוצת ה-LLIN בלבד, כאשר שיעור הפריון הממוצע המוערך הנמוך ביותר היה 64.5%.
מ-389 אן.מחקר של יחידות דם בודדות מגמביה מצא כי 80.5% (n=313) היו ממוצא אנושי, 6.2% (n=24) מהנשים צרכו דם מעורב (אנושי וביתי) ו-5.1% (n=20) צרכו דם .מזון מבעלי חיים (בקר, כבשים ועיזים) ו-8.2% (n=32) מהדגימות שנותחו היו שליליות עבור קמח דם.בקבוצת LLIN + Bti, שיעור הנשים שקיבלו דם אנושי היה 25.7% (n=100) לעומת 54.8% (n=213) בקבוצת ה-LLIN בלבד (קובץ נוסף 5: טבלה S5).
סך הכל 308 אמפר.P. gambiae נבדק כדי לזהות חברים ממכלול המינים וזיהום P. falciparum (קובץ נוסף 4: טבלה S4).שני "מינים קשורים" מתקיימים במקביל באזור המחקר, כלומר An.gambiae ss (95.1%, n = 293) ו-An.coluzzii (4.9%, n = 15).Anopheles gambiae ss היה נמוך משמעותית בקבוצת LLIN + Bti מאשר בקבוצת LLIN בלבד (66.2%, n = 204) (RR = 2.29 [95% CI 1.78-2.97], P <0.001).שיעור דומה של יתושי אנופלס נמצא בקבוצת LLIN + Bti (3.6%, n = 11) ובקבוצת LLIN בלבד (1.3%, n = 4) (RR = 2.75 [95% CI 0.81-11 .84], P = .118).שכיחות של זיהום Plasmodium falciparum בקרב An.SL בגמביה היה 11.4% (n = 35).שיעורי זיהום ב- Plasmodium falciparum.שיעור ההדבקה בגמביה היה נמוך משמעותית בקבוצת LLIN + Bti (2.9%, n = 9) מאשר בקבוצת LLIN בלבד (8.4%, n = 26) (RR = 2.89 [95% CI 1. 31-7.01 ], P = 0.006).).בהשוואה ליתושי Anopheles, ליתושי Anopheles gambiae היה השיעור הגבוה ביותר של זיהום פלסמודיום, 94.3% (n=32).coluzzii רק 5.7% (n = 5) (RR = 6.4 [95% CI 2.47-21.04], P <0.001).
בסך הכל נסקרו 2,435 אנשים מ-400 משקי בית.הצפיפות הממוצעת היא 6.1 נפשות למשק בית.שיעור הבעלות על LLIN בקרב משקי בית היה 85% (n = 340), לעומת 15% (n = 60) למשקי בית ללא LLIN (RR = 5.67 [95% CI 4.29–7.59], P < 0.001) (קובץ נוסף 5 : טבלה S5)..השימוש ב-LLIN היה 40.7% (n = 990) בקבוצת LLIN + Bti בהשוואה ל-36.2% (n = 882) בקבוצת LLIN בלבד (RR = 1.12 [95% CI 1.02-1.23], P = 0.013).שיעור הניצול הנטו הכולל הממוצע באזור המחקר היה 38.4% (n = 1842).שיעור הילדים מתחת לגיל חמש המשתמשים באינטרנט היה דומה בשתי קבוצות המחקר, עם שיעורי שימוש נטו של 41.2% (n=195) בקבוצת LLIN + Bti ו-43.2% (n=186) בקבוצת LLIN בלבד.(HR = 1.05 [95% CI 0.85-1.29], P = 0.682).בקרב ילדים בגילאי 5 עד 15 שנים, לא היה הבדל בשיעורי השימוש נטו בין 36.3% (n = 250) בקבוצת LLIN + Bti לבין 36.9% (n = 250) בקבוצת LLIN בלבד (RR = 1. 02 [ CI 95% 1.02-1.23], P = 0.894).עם זאת, אנשים מעל גיל 15 השתמשו ברשתות מיטה ב-42.7% (n = 554) בתדירות נמוכה יותר בקבוצת LLIN + Bti מאשר 33.4% (n = 439) בקבוצת LLIN בלבד (RR = 1.26 [95% CI 1.11-1.43 ], P <0.001).
סך של 2,484 מקרים קליניים נרשמו במרכז הבריאות Napier בין מרץ 2018 לפברואר 2020. השכיחות של מלריה קלינית באוכלוסייה הכללית הייתה 82.0% מכלל המקרים של פתולוגיה קלינית (n=2038).שיעורי ההיארעות המקומיים השנתיים של מלריה באזור מחקר זה היו 479.8‰ ו-297.5‰ לפני ואחרי טיפול Bti (טבלה 2).
זמן פרסום: יולי-01-2024